TruSeq Stranded Total RNA with Ribo-Zero Globin

采用高效率的工作流程从血液来源RNA制备全转录组测序文库,在单个步骤内即可除去核糖体RNA和球蛋白mRNA。

11.5小时

分析时间

5.5小时

手动操作时间

0.1–1 ug血液来源的高质量纯化总RNA

起始量

详情请参见规格表

概述

TruSeq Stranded Total RNA with Ribo-Zero Globin采用迅捷高效的测序文库制备工作流程,能从血液来源的总RNA中得到清晰、完整的转录组视图。

主要特点

  • 均匀覆盖并精确测量链方向

  • 高度可靠地揭示替代转录本、反义表达和等位基因特异性表达

  • 揭示编码RNA和多种形式的非编码RNA

能得到精确链信息的高质量全转录组分析

这些试剂盒结合了Ribo-Zero核糖体RNA还原化学技术与RNA测序(RNA-Seq)技术的优势,可用于人类、小鼠或大鼠样本的全转录组分析。

一步高效去除核糖体RNA和球蛋白mRNA

对血液来源的RNA进行全转录组分析需要去除两种在全血中含量较高的RNA——核糖体RNA(包括细胞质rRNA和线粒体rRNA)和球蛋白mRNA。

传统去除方法需要两个步骤才能完成。这意味着需要的试剂更多、工作流程更长、损失的RNA更多。TruSeq Stranded Total RNA with Ribo-Zero Globin利用了Ribo-Zero测序化学技术,能通过一个简单、快速的步骤高效去除两种含量较高的RNA。

规格

需要的产品

Illumina现提供模块化产品的预订,让您的工作流程变得灵活。您可以订购带有以下任何标签的以下任何文库制备产品。

/ 结果

应用

工作流程示例

1
制备

TruSeq Stranded Total RNA with Ribo-Zero Globin

项目建议

仪器 推荐的样本数 读长
NextSeq 550系统

RNA分析:每次运行6–20个样本(基于每个样本2000万条read)
转录组分析:每次运行2–8个样本(基于每个样本5000万条read)

2×75 bp
2×75 bp

NovaSeq 6000系统

RNA分析(每次运行的样本,双流动槽):S1:160、S2:320、S4:768。受标签组合的限制(双重)。基于2000万条read。
转录组分析(每次运行的样本,双流动槽):S1:64、S2:128、S4:400。受标签组合的限制(双重)。基于5000万条read。

≤ 2 × 100 bp
≤ 2 × 100 bp

相关应用和方法

比较

TruSeq Stranded Total RNA with Ribo-Zero Globin Illumina Stranded Total RNA Prep with Ribo-Zero Plus或Ribo-Zero Plus Microbiome
分析时间 11.5小时 约7小时
自动化功能 液体处理机器人 液体处理机器人
内容说明 捕获编码RNA以及多种形式的非编码RNA 捕获编码RNA以及多种形式的非编码RNA
说明 用于血液来源RNA的全转录组测序研究。去除细胞质rRNA、线粒体rRNA和珠蛋白mRNA。 用于从低RNA起始量和低质量样本制备全转录组测序文库,支持多种RNA-Seq应用。包括Ribo-Zero Plus,用于单管去除来自多个物种的rRNA和珠蛋白RNA,以便进行丰富的转录组分析。 
手动操作时间 5.5小时 <3小时
起始量 0.1–1 ug血液来源的高质量纯化总RNA 标准质量RNA样本为1–1000 ng总RNA。建议至少10 ng总RNA,以获得最佳性能和FFPE样本 
系统 NextSeq 550系统, NextSeq 2000系统, NextSeq 1000系统, NovaSeq X基因测序仪, NextSeq 500系统, NovaSeq 6000系统, NovaSeq X Plus基因测序仪 NextSeq 550系统, NextSeq 2000系统, NextSeq 1000系统, NovaSeq X基因测序仪, NextSeq 500系统, NovaSeq 6000系统, NovaSeq X Plus基因测序仪
作用机制 基于磁珠的rRNA去除、cDNA合成和PCR 酶法rRNA去除,连接接头和标签
方法 全转录组测序 全转录组测序, 宏转录组测序
多重分析 高通量试剂盒:使用组合双标签序列或唯一双标签序列制备96个标签样本, 低通量试剂盒:混合最多12个样本。或混合24个样本(组A和B一起) 多达384个唯一双标签(UDI)
核酸类型 RNA RNA
特殊的样本类型 血液 微生物组样本, 低起始量样本, FFPE组织
物种 小鼠, 人, 大鼠 小鼠, 人, 大鼠, 细菌
Analytical sensitivity rRNA去除:去除人、小鼠和大鼠rRNA(细胞质和线粒体)和球蛋白mRNA Ribo-Zero Plus可去除多个物种的大量转录本,包括:人类细胞质和线粒体rRNA、小鼠rRNA、大鼠rRNA、细菌(大肠杆菌和枯草芽孢杆菌)rRNA以及人类β珠蛋白转录本  Ribo-Zero Plus Microbiome去除了多个物种的大量转录本,包括:在Ribo-Zero Plus中去除的转录本以及多种微生物物种和ATCC MSA-2002, MSA-2005和MSA-2006 
技术 Illumina测序 Illumina测序
变异类别 单核苷酸多态性(SNP), 基因融合, 新型转录本, 转录本变异 单核苷酸多态性(SNP), 基因融合, 新型转录本, 转录本变异

技术平行分析

FFPE组织的技术平行分析显示出高度的一致性,表明文库制备的性能稳定。轴为log2(FPKM)。显示 R2值。

均匀覆盖转录本

TruSeq Stranded Total RNA在新鲜冷冻(FF,上图)和FFPE(下图)肿瘤以及匹配正常乳腺组织中的前1,000个表达转录本中具有出色的覆盖度,比对链read>98%。X轴:转录本的不同位置,Y轴:结合read的覆盖度百分比。

文库制备 (2)

TruSeq® Stranded Total RNA Library Prep Globin(48样本)

20020612

包括用于从血液样本中去除rRNA和球蛋白mRNA的RiboZero磁珠、用于将RNA转录成cDNA的PCR预混液,以及用于制备48个样本的试剂。单独购买标签接头和纯化磁珠。

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TruSeq® Stranded Total RNA Library Prep Globin(96样本)

20020613

包括用于从血液样本中去除rRNA和球蛋白mRNA的RiboZero磁珠、用于将RNA转录成cDNA的PCR预混液,以及用于制备48个样本的试剂。单独购买标签接头和纯化磁珠。

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标签接头 (4)

TruSeq RNA CD Index Plate(96标签,96样本)

20019792

TruSeq Stranded RNA HT Kit 96样本接头孔板盒

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IDT for Illumina – TruSeq RNA UD Indexes(24标签,96样本)

20020591

唯一双重标签(UDI),与TruSeq Stranded mRNA和TruSeq Stranded Total RNA Library Prep Kit兼容。UDI试剂盒以孔板形式供货,包含24个UDI(x4),足够用于96个样本。

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IDT for Illumina – TruSeq DNA UD Indexes v2(96标签,96样本)

20040870

包含96、8 bp标签,足以标记96个样本,与TruSeq Nano和TruSeq PCR-Free Library Prep Kit兼容。版本 2 包含板 20022370 中 192 个标签寡核苷酸中 8 个的改进,其余 184 个未作更改。单独购买文库制备和探针panel。

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IDT for Illumina – TruSeq RNA UD Indexes v2(96标签,96样本)

20040871

包含96、8 bp标签,足以标记96个样本,与TruSeq Stranded mRNA和TruSeq Stranded Total RNA Library Prep Kit兼容。版本 2 包含板 20022371 中 192 个标签寡核苷酸中 8 个的改进,其余 184 个未作更改。单独购买文库制备和探针panel。

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选择汇总

产品

数量

Unit Price

NovaSeq X系列

将先进的化学、光学和信息学技术相结合,实现了超凡的速度和数据质量、出色的通量和可扩展性。

MiSeq v3试剂盒

与早期版本相比,优化的试剂盒可增加簇密度和读长,从而提高测序质量分值。

TruSight Oncology 500

使用涵盖所有主要变异类别以及来自FFPE组织的基因特征(TMB、MSI和HRD)的大型泛癌panel实现CGP。

Illumina DNA Prep

快速、集成的文库制备工作流程,适用于各种测序应用。

标签使用有限许可:

TruSeq Stranded Total RNA with Ribo-Zero Globin工作流程的产品及其使用受Max Planck Gesellschaft所拥有且独家授权给New England Biolabs, Inc.并再授权给Illumina, Inc.的一个或多个已公告和/或待批准的美国和外国专利申请的约束。向Illumina, Inc.其关联机构或其授权经销商和分销商购买此产品,即向买方转让使用买方所购数量产品和产品组件的权利(不论买方是学术性还是盈利性实体),该权利不可转让。购买此产品并不会转让前述专利或专利申请中针对产品生产的任何权利要求项下的许可。买方不得向第三方出售或以其他方式转让此产品及其组件,亦不得以其他方式将此产品用于下商业用途:(1)在生产中使用此产品或其组件;或(2)出于治疗或预防疾病的目的,在人或动物身上使用此产品或其组件。

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