Illumina Stranded mRNA Prep

가닥 정보를 정밀하게 측정하여 단백질 코딩 전사체를 정확하고 편향되지 않게 검출하기 위한 신속하고 비용 효율적인 워크플로우.

6.5시간

Assay 시간

< 3시간

수작업 시간

표준 품질 Total RNA 25~1,000 ng

사용량

상세한 정보는 사양표를 확인하세요.

개요

Illumina Stranded mRNA Prep은 새로운 동형(isoform), 유전자 융합(gene fusion) 및 대립유전자 특이적 발현과 같은 특징의 발견에 대해 코딩 전사체 전반에 걸쳐 명확하고 포괄적인 분석을 위한 간소화된 RNA 시퀀싱(RNA-Seq) 솔루션을 제공합니다.

주요 기능

  • 가닥 방향의 정밀한 측정—역배열 전사 검출을 가능하게 하고 전사물 어노테이션을 향상시키며 정렬 효율을 높입니다.

  • 탁월한 성능—탁월한 폴리A 포획 효율성과 커버리지 균일성을 제공하여 코딩 전사체를 정확하고 편향 없이 검출하기 위해 필요한 시퀀싱 뎁스를 최소화합니다.

    기술에 대해 더 알아보기

  • 저사용량 샘플에서 고품질 데이터—25 ng의 고품질 RNA*만으로 고감도 결과 달성

  • 빠른 라이브러리 준비 워크플로우—TruSeq Stranded mRNA보다 약 40% 빠르게 라이브러리를 준비하고, 배양 시간을 단축하며 샘플 세척 단계가 감소하여 총 assay 시간이 6.5시간

*FFPE 샘플에 적합하지 않음


사양

필수 제품

처리 요구에 맞는 Library Prep Kit 크기(16개 샘플 또는 96개 샘플)를 선택합니다.

고유한 듀얼 인덱스(unique dual index)는 별도로 판매되며 멀티플렉싱(multiplexing)에 필요합니다. 표적 시퀀싱 처리량에 가장 적합한 인덱싱 옵션을 선택하세요. 세트 A, B, C 및 D를 함께 추가하여 한 번의 런으로 최대 384개의 샘플을 시퀀싱할 수 있습니다. 시퀀싱 처리량 및 멀티플렉싱 기능은 시퀀서 및 플로우 셀 시약에 따라 다를 수 있습니다.

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애플리케이션

Illumina Stranded mRNA Prep을 사용하면 광범위한 샘플 유형에서 표준(비분해) RNA의 낮은 샘플 사용량으로 하루에 시퀀싱 준비가 된 전사체 라이브러리를 준비할 수 있습니다.

워크플로우 예시


프로젝트 권장 사항

기기 권장 샘플 수 리드 길이
NextSeq 550 시스템

Mid output: 5
High output: 16
(based on 25M reads per sample)

2 × 75 bp

NextSeq 2000 시스템

P2: 16
P3: 48
(based on 25M reads per sample)

2 × 75 bp

NovaSeq 6000 시스템

SP: 32
S1: 64
S2: 164
S4: 384
(based on 25M reads per sample)

2 × 75 bp



관련 애플리케이션 및 방법

문서

제품 관련 자료

비교하기

Illumina Stranded mRNA Prep TruSeq Stranded mRNA Illumina RNA Prep with Enrichment Illumina Stranded Total RNA Prep with Ribo-Zero Plus 또는 Ribo-Zero Plus Microbiome
Assay 시간 6.5시간 ~10.5시간 < 9시간 약 7시간
자동화 기능 리퀴드 핸들링 로봇 리퀴드 핸들링 로봇 리퀴드 핸들링 로봇 리퀴드 핸들링 로봇
자동화 상세 정보 사용 가능한 자동화 방법 살펴보기 사용 가능한 자동화 방법 살펴보기
콘텐츠 사양 가닥 정보가 있는 코딩 전사체 캡처 가닥 정보가 있는 코딩 전사체 캡처 Illumina Exome Panel과 함께 사용 시 코딩 전사물 캡처 코딩 RNA와 여러 형태의 비코딩 RNA 캡처
설명 정밀한 가닥 정보가 있는 코딩 전사체의 분석을 위한 단순하고 비용 효율적인 솔루션입니다. 정밀한 가닥 정보로 연구자들에게 코딩 전사체에 대한 명확하고 종합적인 관점을 제공합니다. 포르말린 고정 파라핀 포매(FFPE) 조직 및 기타 저품질 샘플 등 광범위한 샘플의 종류와 사용량으로부터 표적 전사물(transcript) 검출 및 발견 연구를 가능하게 하는 재현 가능하고 경제적인 솔루션입니다. 다양한 RNA-Seq 애플리케이션을 지원하는 저 RNA 입력 및 저품질 샘플에서 전체 전사체 시퀀싱 준비 라이브러리를 준비하는 데 사용됩니다. 풍부한 전사체 분석을 용이하게 하기 위해 여러 종에서 rRNA 및 글로빈 RNA의 단일 튜브 고갈을 위한 Ribo-Zero Plus를 포함한다. 
수작업 시간 < 3시간 ~4.5시간 < 2시간 < 3시간
사용량 표준 품질 Total RNA 25~1,000 ng Total RNA 0.1~1 ug 또는 이전에 분리한 mRNA 10~100 ng(폴리A 꼬리가 있는 종) RNA 10 ng, FFPE RNA 20 ng 표준 품질 RNA 검체에 대해 1–1000 ng 총 RNA. 최적의 성능 및 FFPE 검체에 대해 최소 10 ng 총 RNA 권장 
기기 NextSeq 550 시스템, NextSeq 2000 시스템, NextSeq 1000 시스템, NovaSeq X 시스템, NextSeq 500 시스템, NovaSeq 6000 시스템, NovaSeq X Plus 시스템 MiSeq 시스템, NextSeq 550 시스템, NextSeq 2000 시스템, NextSeq 1000 시스템, NovaSeq X 시스템, NextSeq 500 시스템, NovaSeq 6000 시스템, NovaSeq X Plus 시스템 MiSeq 시스템, iSeq 100 시스템, NextSeq 550 시스템, NextSeq 2000 시스템, NextSeq 1000 시스템, MiniSeq 시스템, NovaSeq 6000 시스템, MiSeq i100 Plus 시스템, MiSeq i100 시스템 NextSeq 550 시스템, NextSeq 2000 시스템, NextSeq 1000 시스템, NovaSeq X 시스템, NextSeq 500 시스템, NovaSeq 6000 시스템, NovaSeq X Plus 시스템
작용 기전 폴리A 포획, 라이게이션 기반 어댑터 및 인덱스 추가 Oligo-dT 비드가 폴리A 꼬리 포획 Bead-linked transposome 효소 rRNA 제거, 어댑터 및 인덱스의 라이게이션 기반 첨가
방법 mRNA 시퀀싱 mRNA 시퀀싱 mRNA 시퀀싱, 표적 RNA 시퀀싱, 표적 인리치먼트 전장 전사체 시퀀싱, 메타전사체 시퀀싱
멀티플렉싱 최대 384개의 고유한 듀얼 인덱스(UDI) 1~96 최대 384개의 고유한 듀얼 인덱스(UDI) 최대 384개의 고유한 듀얼 인덱스(UDI)
핵산 종류 RNA RNA RNA RNA
특수 샘플의 종류 FFPE 호환 불가, 사용량이 적은 샘플 FFPE 호환 불가 혈액, 사용량이 적은 샘플, FFPE 조직 마이크로바이옴 샘플, 사용량이 적은 샘플, FFPE 조직
종 카테고리 포유류, 소, 마우스, 인간, 래트 포유류, 소, 마우스, 인간, 래트 인간, 바이러스 마우스, 인간, 래트, 세균
종 세부 사항 폴리A 꼬리가 있는 종의 고품질 RNA로 작업 폴리A 꼬리가 있는 종의 고품질 RNA로 작업 Ribo-Zero Plus는 인간 세포질 및 미토콘드리아 rRNA, 마우스 rRNA, 랫트 rRNA, 박테리아(E. coli 및 B. 서브틸리스) rRNA, 및 인간 베타 글로빈 전사물을 포함하는 다수의 종으로부터 풍부한 전사물을 고갈시킨다.  Ribo-Zero Plus 미생물군유전체는 Ribo-Zero Plus에서 고갈된 것들과 다양한 미생물종 및 ATCC MSA-2002, MSA-2005 및 MSA-2006 을 포함한 여러 종의 풍부한 전사물을 고갈시킨다.
가닥 특이성 가닥(Stranded) 가닥(Stranded) 비가닥(Non-stranded) 가닥(Stranded)
시스템 호환성 세부 사항 라이브러리 준비는 모든 Illumina 시퀀싱 시스템과 호환되도록 설계되었으며 NextSeq 500/550 및 NovaSeq 6000 시스템에서 광범위한 검증 절차를 거쳤습니다.
기술 시퀀싱 시퀀싱 시퀀싱 시퀀싱
변이 클래스 단일 염기 다형성(SNP), 유전자 융합, 새로운 전사물, 전사물 변이 단일 염기 다형성(SNP), 유전자 융합, 새로운 전사물, 전사물 변이 단일 염기 다형성(SNP), 유전자 융합, 새로운 전사물, 전사물 변이 단일 염기 다형성(SNP), 유전자 융합, 새로운 전사물, 전사물 변이

선택 도구:

그림

성능 지표 비교

(왼쪽) Illumina Stranded mRNA Prep(오른쪽) Illumina Stranded mRNA Prep에 대한 성능 지표를 TruSeq Stranded mRNA와 비교했습니다. Illumina Stranded mRNA Prep은 특히 25 ng UHR RNA의 사용량으로 우수한 성능을 보였습니다.

낮은 사용량에서 유전자 발견 확대

Illumina Stranded mRNA Prep은 TruSeq Stranded mRNA와 비교해 낮은 RNA 사용량으로 유전자 검출을 더 크게 합니다. 검출된 유전자의 수는 30M 부차 표본 추출된 페어드 엔드 리드 PF에서 보고됩니다. 1 x 커버리지로 검출되는 유전자가 더 많을수록 민감도가 더 높다는 지표입니다.

구형 키트와의 높은 일치성

Illumina Stranded mRNA Prep은 (A) 100 ng UHR RNA와 동등한 사용량 및 (B) 25 ng 대 100 ng UHR RNA의 감소된 사용량에서 TruSeq Stranded mRNA와 일치성이 높은 데이터를 생성합니다.

높은 데이터 일치성

Illumina Stranded mRNA Prep은 (A) 25 ng UHR RNA의 기술적 복제본 간 및 (B) 25 ng와 100 ng UHR RNA의 사용량 간에 높은 데이터 일치성을 달성합니다. 라이브러리를 2 × 74 bp에서 시퀀싱하고, 30M 리드로 부차 표본 추출했습니다. BaseSpace RNA-Seq Alignment 앱을 사용하여 데이터 분석을 수행할 수 있습니다.

Illumina Stranded mRNA Prep 워크플로우

Illumina Stranded mRNA Prep은 수작업 시간을 줄이면서 빠른 워크플로우를 제공합니다. 시간은 사용된 장비, 처리된 샘플 수, 자동화 절차 또는 사용자 경험에 따라 다를 수 있습니다.

자주 묻는 질문

중복 유전자로부터 유전자 발현을 정확하게 밝혀내기 위해, 원시 가닥에서 발견되는 정보를 보관하는 것이 중요합니다. Stranded RNA-Seq는 첫 번째 및 두 번째 cDNA 가닥이 구별될 수 있게 하여 첫 번째 cDNA 가닥(원시 가닥)이 추가 PCR 증폭을 거치는 동안 두 번째 가닥이 분해될 수 있게 합니다.

라이브러리 준비에는 6.5시간이 소요되며 수작업 시간은 3시간 미만입니다.

올리고(dT) 자석 비드는 폴리A 꼬리를 포함하는 mRNA를 포획하고 정제합니다. 정제된 mRNA를 절편화하고 역전사효소 및 무작위 프라이머를 사용하여 첫 번째 가닥 cDNA에 복사합니다. 두 번째 가닥 cDNA 합성 단계에서, dUTP는 가닥 특이성을 달성하기 위해 dTTP를 대체합니다. 최종 단계에서는 아데닌 및 티민 염기를 절편 말단에 첨가하고 어댑터를 연결합니다. 생성된 생성물을 정제하고 시퀀싱을 위해 선택적으로 증폭시킵니다.

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라이브러리 프렙 (2)

Illumina® Stranded mRNA Prep, Ligation (16 Samples).

20040532

Includes reagents for preparing and enriching 16 libraries (16, 1-plex enrichment reactions). Purchase enrichment probe panel, Purification Beads and index adapters separately.

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Discounts:

Illumina® Stranded mRNA Prep, Ligation (96 Samples).

20040534

Includes reagents for preparing and enriching 96 libraries (32, 3-plex enrichment reactions). Purchase enrichment probe panel, Purification Beads and index adapters separately.

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인덱스 어댑터 (8)

Illumina® RNA UD Indexes Set A, Ligation (96 Indexes, 96 Samples)

20091655

Illumina® RNA UD Indexes Set A, Ligation (96 Indexes, 96 Samples) Includes 96, 10 bp indexes sufficient for labeling 96 samples and RNA Index Anchor plate. Used with Illumina Stranded Total RNA Prep and Illumina Stranded mRNA Prep Kits. Purchase library prep reagents separately.

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Discounts:

Illumina® RNA UD Indexes Set B, Ligation (96 Indexes, 96 Samples)

20091657

Illumina® RNA UD Indexes Set B, Ligation (96 Indexes, 96 Samples) Includes 96, 10 bp indexes sufficient for labeling 96 samples and RNA Index Anchor plate. Used with Illumina Stranded Total RNA Prep and Illumina Stranded mRNA Prep Kits. Purchase library prep reagents separately.

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Discounts:

Illumina® RNA UD Indexes Set C, Ligation (96 Indexes, 96 Samples)

20091659

Illumina® RNA UD Indexes Set C, Ligation (96 Indexes, 96 Samples) Includes 96, 10 bp indexes sufficient for labeling 96 samples and RNA Index Anchor plate. Used with Illumina Stranded Total RNA Prep and Illumina Stranded mRNA Prep Kits. Purchase library prep reagents separately.

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Illumina® RNA UD Indexes Set D, Ligation (96 Indexes, 96 Samples)

20091661

Illumina® RNA UD Indexes Set D, Ligation (96 Indexes, 96 Samples) Includes 96, 10 bp indexes sufficient for labeling 96 samples and RNA Index Anchor plate. Used with Illumina Stranded Total RNA Prep and Illumina Stranded mRNA Prep Kits. Purchase library prep reagents separately.

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IDT® for Illumina® RNA UD Indexes Set A, Ligation (96 Indexes, 96 Samples)

20040553

Includes 96, 10 bp indexes sufficient for labeling 96 samples and RNA Index Anchor plate. Used with Illumina Stranded Total RNA Prep and Illumina Stranded mRNA Prep Kits. Purchase library prep and probe panels separately.

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IDT® for Illumina® RNA UD Indexes Set B, Ligation (96 Indexes, 96 Samples)

20040554

Includes 96, 10 bp indexes sufficient for labeling 96 samples and RNA Index Anchor plate. Used with Illumina Stranded Total RNA Prep and Illumina Stranded mRNA Prep Kits. Purchase library prep and probe panels separately.

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IDT® for Illumina® RNA UD Indexes Set C, Ligation (96 Indexes, 96 Samples)

20040555

Includes 96, 10 bp indexes sufficient for labeling 96 samples and RNA Index Anchor plate. Used with Illumina Stranded Total RNA Prep and Illumina Stranded mRNA Prep Kits. Purchase library prep and probe panels separately.

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IDT® for Illumina® RNA UD Indexes Set D, Ligation (96 Indexes, 96 Samples)

20040556

Includes 96, 10 bp indexes sufficient for labeling 96 samples and RNA Index Anchor plate. Used with Illumina Stranded Total RNA Prep and Illumina Stranded mRNA Prep Kits. Purchase library prep and probe panels separately.

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서비스 (1)

Illumina Stranded mRNA LP Kit Training - Customer Site

20044765

2-day on-site training for the Illumina Stranded mRNA Library Preparation Kit. Hands-on training includes quantification of mRNA input as well as best practices, troubleshooting tips, and training on Illumina-supported analysis tools specific to the application workflow.

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NovaSeq X 시리즈 주문

발전된 화학 반응, 광학, 정보학이 결합되어 뛰어난 시퀀싱 속도와 데이터 품질, 뛰어난 처리량과 확장성을 제공합니다.

MiSeq Reagent Kit v3

클러스터 밀도와 판독 길이를 높여 최적화된 시약 키트로 이전 버전에 비해 시퀀싱 품질 점수가 향상되었습니다.

TruSight Oncology 500

모든 주요 변이 클래스와 FFPE 조직에서 추출한 유전자 시그니처(TMB, MSI 및 HRD)를 다루는 대형 전체 고형암 패널을 통해 CGP를 지원합니다.

Illumina DNA Prep

다양한 시퀀싱 애플리케이션에 사용할 수 있는 빠르고 통합된 라이브러리 준비 워크플로우입니다.

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