Illumina sequencing technology

采用专有的可逆终止子测序化学方法，对数百万片段进行大规模并行测序，以此为基础建立全新检测平台。该新型测序技术，联合Genome Analyzer, 可为我们提供创造出一种功能强健、准确度高和拓展性强的系统，这个这一系统可为下一代基因测序技术制定重现性、成本-效益以及准确性的的新标准。

Illumina测序技术依赖随机化分段的基因组DNA与平坦、光学透明表面的粘附。粘附的DNA片段经延伸、桥式放大后形成八千万至一亿簇超高密度序列流动槽，每簇含有大约1000个相同模板拷贝。这些模板采用功能强健的四色DNA合成测序技术进行测序，该技术利用含可去除的荧光染料的可逆终止子。这项新方法保证了测序的高精度和逐个碱基测序的真实性，消除了序列-背景特异性误差，同时支持寡聚和重复性序列测序。

采用激光激发与全内反射光学技术可获得高灵敏度的荧光检测。通过与参考基因的比对进行序列读取，同时采用专门开发的数据分析管道软件获取基因差异性结果。其他灵活的样品制备方法，可使可使该系统广泛应用于包括基因表达、小分子RNA发现 以及蛋白-核酸相互作用的研究中。

完成首次读取后，模板可进行原位再生，以确保从片段另一端进行超过每秒50bp的读取。配对端双端对读模块可以引导再生和扩增操作，制备第二轮测序用的模板。首先，去除新测序链，将互补链进行桥式放大成簇。一旦将原先模板断裂裂解并去除，反向链就可进行合成测序。在模板另一端开始第二轮测序，可以从每一流程总数超过10Gb的配对端数据中读取50bp以上。



Illumina sequencing system workflow